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产品与合作

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Business Cooperation

LZCapTM AG(3'Acm)
产品货号:HN3004

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产品描述:LZCapTM AG (3'Acm)是一种Cap1类似物,可以作为mRNA共转录加帽试剂,在T7聚合酶作用下,利用LZCapTM AG (3'Acm)、NTPs以及模板DNA共转录产生带5’端Cap 1结构的mRNA,加帽后的mRNA能直接在细胞和体内翻译表达。广泛应用于体外转录、基因编辑、疫苗研发、肿瘤CAR-T治疗、蛋白代替疗法以及再生医学等领域。

LZCapTM AG (3'Acm)需要T7启动子以AG作为起始序列,LZCapTM AG (3'Acm)的加帽率可达99%,1μg起始模板量转录产生100-200μg mRNA。

分子式:C35H48N16O24P4(游离酸)

分子量:1200.75(游离酸)

CAS号:/

浓  度:100 mM

规  格:100 μL/支、1 mL/支

纯  度:HPLC ≥95%

盐  型:NH4+

运输与保存:干冰运输,-20°C保存,避免反复冻融。


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     为了进一步降低mRNA的免疫原性,恒诺康还可以为您提供修饰核苷酸N1-Me-pUTP(N1-甲基假尿苷三磷酸)(货号:HN1002)用来代替UTP参与转录反应。

          备注:

1)     LZCapTM AG (3'Acm)适用于以5’AG 3’起始序列的T7启动子转录载体,在载体构建时需要加以考虑。

2)     实验所用的试剂耗材和容器等无RNase污染。

3)     建议使用线性化的DNA模板进行转录。

4)     使用修饰核苷酸代替野生型核苷酸时,反应终浓度不变。

5)     若使用PCR产物作为转录起始模板,DNA模板量可以减少一半。

3. 将配置好的反应液混匀,短暂离心后,置于37℃孵育2-3小时。若转录本长度小于 100nt,增加反应时间至 4-8 h。

转录产量

LZCap™ AG (3'Acm)加帽率可达99%,1μg线性化DNA模板转录产量为100~200μg。以luciferase基因作为DNA模板,进行体外共转录后,通过琼脂糖电泳以及NanoDrop 分光光度计检测转录产物的完整性和浓度如下:

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细胞表达

 转录所得包含luciferase基因的mRNA转染293T细胞,检测荧光值,判断加帽与不加帽mRNA的翻译表达情况。检测结果显示LZCapTM AG (3'Acm)加帽的mRNA细胞表达是市售Cap 1类似物的2-3倍。

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RNase检测

检测原理基于高度敏感和特异性的RNAase探针底物,该底物与有活性RNase发生反应并释放荧光。(Ex/Em=495/520nm),检测极限是0.4pg RNase/孔。本实验证明该样品无RNase污染。

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